Améliorer un SRAS

Rapports scientifiques volume 13, Numéro d'article : 4690 (2023) Citer cet article

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Les tests antigéniques à flux latéral ont été largement utilisés dans la pandémie de Covid-19, permettant des résultats de tests de diagnostic plus rapides et empêchant une propagation virale supplémentaire grâce à l’isolement des personnes infectées. La réalisation de ce dépistage doit être réalisée avec des tests présentant une sensibilité satisfaisante afin de réussir à détecter la protéine cible et d'éviter les faux négatifs. Le but de cette étude était de créer un test à flux latéral capable de détecter la protéine de la nucléocapside du SRAS-CoV-2 à de faibles concentrations comparables aux limites de détection revendiquées par les tests existants sur le marché. Pour ce faire, plusieurs ajustements ont été nécessaires lors de la recherche et du développement des prototypes jusqu'à ce qu'ils soient cohérents avec ces critères. Les alternatives proposées consistant à augmenter la concentration en anticorps de la ligne de test et à ajouter une intermembrane entre le tampon conjugué et la membrane de nitrocellulose ont pu multiplier par quatre la sensibilité et générer un nouveau prototype de test rapide appelé « test immunologique intermembranaire à flux latéral » (LFIIT) . Ce prototype a montré une limite de détection adéquate (2,0 ng mL−1) tout en maintenant un prix abordable et une simplicité dans les processus de fabrication.

En décembre 2019, plusieurs patients ont été hospitalisés dans la ville de Wuhan, province du Hubei, en Chine, avec des symptômes respiratoires de type pneumonie d'étiologie inconnue, des études ultérieures montrant des preuves irréfutables que le marché des fruits de mer et de la faune sauvage de Huanan à Wuhan pourrait être lié à l'épidémie. L’agent causal a été identifié comme un bêtacoronavirus du sous-genre sarbecovirus, appartenant à la sous-famille des Orthocoronavirinae, et a été initialement nommé 2019-nCoV, qui sera ensuite renommé SARS-CoV-21.

Les coronavirus sont des virus enveloppés à ARN simple brin positif qui affectent principalement les voies respiratoires, mais sont également capables de provoquer des effets neurologiques, entériques et hépatiques2,3. Jusqu’en décembre 2019, six coronavirus étaient connus pour infecter l’homme, quatre d’entre eux provoquant de légers symptômes pseudo-grippaux, tandis que les deux autres étaient responsables d’épidémies hautement pathogènes : le SRAS-CoV et le MERS-CoV4,5,6. De même, en mars 2020, l’Organisation mondiale de la santé (OMS) a déclaré la nouvelle maladie à coronavirus (COVID-19) une pandémie mondiale causée par le SRAS-CoV-27,8.

Le SRAS-CoV-2 partage 79,5 % de similarité génétique avec le SRAS-CoV et l'assemblage des particules virales dépend de quatre protéines structurelles principales : les protéines membranaires (M), nucléocapside (N), d'enveloppe (E) et de pointe (S), en plus de protéines non structurales et accessoires9,10. La principale méthode d’infection du SRAS-CoV-2 repose sur la glycoprotéine Spike, qui présente une structure trimérique à la surface du virus. Il est composé de deux sous-unités : S1 et S2, étant donné que S1 possède un domaine de liaison au récepteur (RBD) et est responsable de la liaison à l'enzyme de conversion de l'angiotensine 2 (ACE2), le principal récepteur du SRAS-CoV-2 dans les cellules hôtes11. Pour cette raison, la protéine Spike a été ciblée avec une grande attention pour la recherche et le développement de médicaments thérapeutiques et de vaccins contre le COVID-1912. Cependant, la protéine Spike est également la protéine structurelle la plus affectée par les mutations génétiques sur différentes variantes du SRAS-CoV-2, ce qui entraîne des changements importants dans la reconnaissance des anticorps, affectant les tests de diagnostic et les vaccins13. Des études similaires ont montré que la protéine N est beaucoup plus conservée entre les variantes et que ses mutations n’affectent pas jusqu’à présent la liaison des anticorps dans les tests de diagnostic rapide, ce qui en fait une meilleure cible pour les tests rapides de l’antigène du SRAS-CoV-214.

Les tests rapides offrent plusieurs avantages par rapport aux méthodes de laboratoire traditionnelles qui nécessitent du personnel et des équipements formés et prennent plus de temps pour obtenir des résultats15. De plus, les tests antigéniques ont tendance à bien corréler avec le statut de contagiosité du patient, se révélant comme un outil puissant pour isoler les personnes infectées et réduire la propagation du virus, par rapport aux méthodes moléculaires16.